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B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商

簡(jiǎn)要描述：B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商
細(xì)胞名稱(chēng)戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
細(xì)胞別稱(chēng)B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D
細(xì)胞貨號(hào)SNL-026
細(xì)胞種屬絨猴
生長(zhǎng)情況懸浮

產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家
更新時(shí)間：2023-05-31
訪(fǎng) 問(wèn) 量：775

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品牌	其他品牌	CAS	詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子式	詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)	純度	詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量	詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)	貨號(hào)	SNL-026
規(guī)格	T25瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	實(shí)驗(yàn)	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

------尚恩生物 I8627859203--------

B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱(chēng)戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞

細(xì)胞別稱(chēng)B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D

細(xì)胞貨號(hào)SNL-026

細(xì)胞種屬絨猴

生長(zhǎng)情況懸浮

培養(yǎng)條件1640+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天

培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

傳代比例1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）

傳代方法1.混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min，棄上清；

2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；

3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；

注意事項(xiàng)部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落，不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細(xì)胞操作，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。

三、細(xì)胞凍存操作

凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);

凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml，1ml每管

凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；

2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存

3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案

Tips：

1.細(xì)胞懸浮圓形生長(zhǎng)，聚團(tuán)或分散生長(zhǎng)；

2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞，如果無(wú)法判斷，可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率；

3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間，密度過(guò)低或者過(guò)高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)；

	處理步驟	T25瓶	凍存管
1	快遞保存溫度	室溫	液氮長(zhǎng)期保存或-80度3天以?xún)?nèi)
2	初步平衡	T25瓶表面消毒后，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上	無(wú)須平衡，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
3	處理方式	吸走大部分培養(yǎng)基，留10-12ml培養(yǎng)基，拍照并觀(guān)察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上	37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右，1min為宜，棄上清，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞并拍照，24h后換液一次
4	接種方式	T25傳代第①次建議1:2傳代，即瓶T25傳成兩瓶	一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
5	注意事項(xiàng)	若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮，T25瓶不開(kāi)封，放至37度培養(yǎng)箱過(guò)夜，若細(xì)胞貼壁即說(shuō)明活性正常，按正常操作消化傳代即可；若未貼壁，收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后，將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中，同時(shí)原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng) 發(fā)貨T25瓶裝滿(mǎn)大約有75ml培養(yǎng)基，可以收集起來(lái)，1500rpm離心5min后，取上清4度保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過(guò)渡到客戶(hù)自己的培養(yǎng)基	收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀(guān)察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存，以上情況及時(shí)反饋干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右，長(zhǎng)時(shí)間保存會(huì)出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支，客戶(hù)先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶(hù)同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方將不提供免費(fèi)售后服務(wù)

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